近年來(lái)，不管是“80后”還是“90后”都希望通過(guò)化妝品來(lái)延緩皮膚衰老。皮膚衰老表現(xiàn)之一就是出現(xiàn)皺紋，因此抗皺成為消費(fèi)者的一大需求。歐盟、韓國(guó)和日本等組織和國(guó)家已經(jīng)建立了抗皺化妝品功效評(píng)價(jià)指南，或推出了功效原料清單，而我國(guó)尚無(wú)相關(guān)法規(guī)出臺(tái)，因此加強(qiáng)對(duì)抗皺功效方法的研究將會(huì)更有利于抗皺化妝品的監(jiān)管和市場(chǎng)的良性發(fā)展?？拱櫘a(chǎn)品的評(píng)價(jià)方法主要有體外法和在體法兩種。
體外法
抗皺功效實(shí)質(zhì)上是抗衰老功效的細(xì)化分支，因此在體外功效評(píng)價(jià)方法上存在很多共性。體外評(píng)價(jià)方法包括生物化學(xué)法、細(xì)胞生物學(xué)法和三維重組皮膚模型替代法等[1]。目前，對(duì)抗衰的研究已經(jīng)從表觀形態(tài)深入到使用產(chǎn)品前后皮膚深層結(jié)構(gòu)的變化。在化妝品抗皺細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，通常使用人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞或三維重組皮膚模型，研究抗皺成分對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖的影響。
01 生物化學(xué)方法
生物化學(xué)法一般包括清除自由基實(shí)驗(yàn)、超氧陰離子自由基實(shí)驗(yàn)、羥自由基實(shí)驗(yàn)、氧自由基吸附能力實(shí)驗(yàn)[2]、抑制金屬蛋白酶和彈性蛋白酶實(shí)驗(yàn)[3]。
皺紋的產(chǎn)生與皮膚老化有關(guān)，而自由基是導(dǎo)致皮膚過(guò)早老化的最大原因之一。方法中清除自由基實(shí)驗(yàn)、超氧陰離子自由基實(shí)驗(yàn)、羥自由基實(shí)驗(yàn)、氧自由基吸附能力實(shí)驗(yàn)都是從自由基角度間接對(duì)抗皺功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs是一類生物活性依賴于鋅離子、有降解細(xì)胞外基質(zhì)能力的內(nèi)肽酶家族[4]。MMPs分泌增加會(huì)加速膠原蛋白的降解,造成皮膚膠原蛋白流失,皮膚松弛,彈性下降,細(xì)紋增多且不斷加深。彈性蛋白酶作為具有極高選擇性和專一性的蛋白分解酶，可以使結(jié)締組織蛋白質(zhì)中的彈性蛋白分解，導(dǎo)致皮膚衰老。因此可以通過(guò)抑制金屬蛋白酶和彈性蛋白酶的能力大小評(píng)價(jià)化妝品的抗皺功效。
生化試驗(yàn)的主要優(yōu)點(diǎn)是體外操作，方法簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)；缺點(diǎn)是不能完全反映人體內(nèi)清除自由基和抗氧化能力的情況，最好與其他方法結(jié)合使用。
02 細(xì)胞生物學(xué)法
細(xì)胞培養(yǎng)一般是將抗皺功效添加劑溶于水或有機(jī)溶劑后用于培養(yǎng)細(xì)胞，皮膚模型還可將活性物質(zhì)配成霜等劑型，涂于重建皮膚模型。通過(guò)觀察化妝品對(duì)細(xì)胞增殖分化能力的影響測(cè)試相關(guān)指標(biāo)，如清除自由基能力、抗氧化能力和膠原蛋白含量[5]，評(píng)價(jià)抗皺活性成分的功效性。細(xì)胞培養(yǎng)相比于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，更接近于生物體，可用于毒性分析和功效測(cè)試，是保證化妝品安全功效的重要手段，但也存在多細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)不成熟、無(wú)法達(dá)到毒理評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)、組織結(jié)構(gòu)較簡(jiǎn)單、各細(xì)胞層分化不良以及某些標(biāo)志物不規(guī)則表達(dá)的缺點(diǎn)。
03 皮膚模型法
歐美等國(guó)家都鼓勵(lì)采用動(dòng)物替代方法，歐盟已下令全面禁止通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行化妝品研究，皮膚模型法將是一種用于化妝品研究的可用替代法。實(shí)驗(yàn)時(shí)將人造皮膚模型在含抗皺活性成分的條件下培養(yǎng)，或者將含抗皺活性成分的配方涂抹于人造皮膚模型上，通過(guò)測(cè)試細(xì)胞活力和細(xì)胞抗氧化等指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)抗皺活性成分的功效。Grazul-Bilska等[6]就通過(guò)將保濕面霜涂于EpiDerm 3D皮膚模型上對(duì)產(chǎn)品功效進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)品總抗氧化能力明顯增強(qiáng)。
在體法
在體法，即人體試用試驗(yàn)，指在志愿者試用基礎(chǔ)上，通過(guò)考察皮膚狀態(tài)參數(shù)變化對(duì)化妝品功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。目前，抗皺功效評(píng)價(jià)常用的是快速成像的方法，如三維成像分析法、輪廓儀測(cè)量法等[7]。
01 保濕試驗(yàn)
保濕試驗(yàn)主要是進(jìn)行皮膚水分含量(MMV)測(cè)試和經(jīng)皮皮膚水分散失(TEWL)測(cè)試，通過(guò)對(duì)使用產(chǎn)品前后角質(zhì)層含水量的變化情況和皮膚屏障功能的好壞來(lái)評(píng)價(jià)化妝品的人體皮膚保濕功能。皮膚干燥會(huì)引起皮膚皺紋,角質(zhì)層含水量處于10%~30%之間的是健康皮膚,若低于10%，皮膚就會(huì)粗糙，進(jìn)而變得容易出現(xiàn)細(xì)紋。保濕試驗(yàn)簡(jiǎn)單易于操作，但是同樣需要結(jié)合其他功效評(píng)價(jià)方法同時(shí)使用。
02 彈性測(cè)定試驗(yàn)
彈性測(cè)定試驗(yàn)主要包括吸力法、扭力法和測(cè)量彈性切力波傳播速度法。測(cè)試時(shí)通過(guò)皮膚拉伸長(zhǎng)度和時(shí)間的關(guān)系曲線得到皮膚的彈性參數(shù)，該方法簡(jiǎn)便迅速，測(cè)量不受皮膚厚度影響，對(duì)于研究皮膚老化來(lái)說(shuō)是一個(gè)較好指標(biāo)，缺點(diǎn)是測(cè)試部位較有局限，并且無(wú)法對(duì)較硬皮膚完成測(cè)量。
03 直接評(píng)價(jià)法
首先要對(duì)皮膚皺紋的輕重程度制定統(tǒng)一的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，研究人員根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)直接對(duì)使用產(chǎn)品前后的受試者皺紋或皺紋照片進(jìn)行等級(jí)評(píng)分，此方法簡(jiǎn)單，容易操作，不需要復(fù)雜設(shè)備，結(jié)果具有一定的可重復(fù)性，但需熟練的評(píng)分人員，且科學(xué)性差。
04 快速成像分析法
利用三維皮膚快速成像系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)處理圖像得到的皺紋參數(shù)是抗皺功效測(cè)試的常用方法，具有快速、穩(wěn)定、精確、可靠、高分辨率等諸多優(yōu)點(diǎn)，且檢測(cè)方法快速簡(jiǎn)單、直接客觀，對(duì)受試者無(wú)負(fù)面影響，是一種比較好的直接非接觸測(cè)量方法。常用的圖像采集方法是利用圖像采集儀器獲得條紋光投影下皮膚三維圖像，如加拿大LMI公司的皮膚快速光學(xué)成像系統(tǒng)Primos。此外，通過(guò)光度立體測(cè)量進(jìn)行3D測(cè)量的輕便便攜式集成系統(tǒng)法國(guó)Pixience公司的多功能皮膚成像分析系統(tǒng)C-Cube等儀器對(duì)皮膚紋理度、皺紋等參數(shù)均可快速、穩(wěn)定、精確、可靠測(cè)量。三維成像分析法更便于人機(jī)交互和直觀的圖像分析。
圖：口周皮膚三維成像圖[8]
結(jié)語(yǔ)
隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，抗皺化妝品的評(píng)價(jià)方法越來(lái)越多?？拱櫣πгu(píng)價(jià)的總體趨勢(shì)是以直接測(cè)量法逐漸取代模型間接測(cè)量法，動(dòng)物試驗(yàn)部分盡量用其他方法替代，評(píng)價(jià)方法朝著更簡(jiǎn)單、客觀、直觀、易于操作的方向發(fā)展。相信只有應(yīng)用更加規(guī)范的評(píng)價(jià)方法，才能使消費(fèi)者選用到放心的化妝品，才能提高企業(yè)對(duì)抗皺化妝品的研發(fā)水平，才能促使我國(guó)化妝品市場(chǎng)更加公平和健康地發(fā)展。
*本文所用圖片均來(lái)自網(wǎng)絡(luò)
參考文獻(xiàn)
轉(zhuǎn)載自：藥大妝研
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